首页 > 技术文章
  • 寻求反义分子
    2010-4-21 1730
    合理的设计和特异性使反义分子抓住了人们的想象力。不过,它们比zui初预测的难生产得多,至今尚无任何证据表明它们具有去除单一基因的功能,而且,还存在许多未预测的非反义效应。本文旨在综述反义策略中产生或破坏特异性的一些因素,讨论通过不同的标准判断治疗的复杂性及研究制剂的必要性。反义分子是指与细胞内DNA或RNA序列相互补形成杂交体而阻断或减弱其转录和翻译过程的DNA或RNA片段。目前研究zui多的反义分子主要有反义寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)和...

  • 兔(Rabbit)肿瘤坏死因子a(TNF-a)ELISA 检测试剂盒
    2010-4-19 2211
    兔TNF-αELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各种体液中的TNF-α。本试剂盒可以检测天然和重组的TNF-α。本试剂盒于科研、而非用于临床诊断。试验原理:兔TNF-α试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TNF-α浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF-α和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生...

  • 人—山羊异质胚胎构建及胚胎干细胞的分离培养
    2010-4-16 1830
    人胚胎干细胞(hESCs)有分化为机体各种细胞的潜能,是再生医学、药物筛选及发育研究的一个重要来源。hESCs是从人胚胎细胞分离培养而来的,然而,人胚胎来源不足严重限制了hESCs的研究。以动物卵母细胞为受体、人体细胞为供体细胞的异质核移植技术为hESCs的研究提供了新的途径,本文尝试了用山羊卵母细胞为受体、人包皮成纤维细胞(HFFs)为供体构建人-山羊异质核移植(human-goatinterspeciesnucleartransfer,hgiNT)胚胎,并分离hESCs,...

  • 细胞培养用液的配制与消毒
    2010-4-14 2946
    一、器材与试剂:干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素.纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。具体步骤:(1)水的制备:细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水.(2)PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):1.溶解定容:将药品(NaCl8.0g,KCl0.2g,Na2HPO4·H2O1.56g,KH2PO40.2g)倒入盛有双蒸水的烧杯中,玻璃棒搅动,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中准...

  • 细胞培养的污染类型
    2010-4-9 1613
    污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。一开始就要十分重视,应积极采取措施,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。*节污染的类型细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质,包括生物和化学物质。一、细菌污染细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染,即使在细胞培养液中加入了抗菌素(一般为预防剂量),也可能因为操作不慎而引起污染。zui常见的有革兰氏阳性菌,如...

  • 分子信标的发展
    2010-4-8 2158
    分子信标是一种设计巧妙的荧光探针。在长度为15-30mer寡核昔酸探针的两端分别加上5-8mer序列互补的茎杆区。在自由状态时由于茎杆区互补序列的结合使探针分子形成发夹状结构,所以又被称为发夹探针。探针的5'端及3'端分别联用荧光素分子及碎灭剂分子。为经典的分子信标结构,其中1-氨基蔡-8-叛酸(EDANS)为荧光素,二甲氨基偶氮苯甲酚(DABSYI.)为猝灭剂。自由状态时,发夹结构的两个末端靠近,使荧光分子与碎灭分子靠近(约为7-1Onm)。此时发生荧光共振能量转移,使荧光...

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