大鼠甲2型流感病毒说明书

大鼠甲2型流感病试剂仅供研究使用。
                                                                     96T
 
使用目的：
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中甲2型流感病毒表达。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠甲2型流感病毒表达。用纯化的大鼠甲2型流感病毒抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中甲2型流感病毒相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的甲2型流感病毒抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中大鼠甲2型流感病毒的存在与否。
试剂盒组成

1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 阳性对照 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 阴性对照 0.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个

标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.         编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
 
 
2.         加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.         温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
4.         配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.         洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.         加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除
 
 
计算和结果判定：
  试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
 临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
 阴性判定：样品OD值< 临界值（CUT OFF）者为大鼠甲2型流感病毒阴性
 阳性判定：样品OD值≥ 临界值（CUT OFF）者为大鼠甲2型流感病毒阳性
注意事项
1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物请避光保存。
6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm
7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
 

ELISA试剂盒