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ELISA试剂盒做标准曲线样品检测时需要注意

2017-01-17 [2776]

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ELISA试剂盒做标准曲线样品检测时需要注意:
1)设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,2)即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限,而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度zui陡段,即曲线几乎成直线的范围内。
3)样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。
3)用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
4)检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。
5)标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。
6)做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999。
ELISA试剂盒浸泡式洗涤方式步骤:
(1)吸干或甩干孔内反应液;
(2)用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);
(3)浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;
(4)吸干孔内液体,吸干应*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;
(5)重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定),如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
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