ELISA试剂盒的组成和操作步骤

今日天气晴朗，一扫昨日阴雨天气，暖暖的太阳让这3.8妇女节更显温馨，研域(上海)化学试剂有限公司给我们带来夸姣的节日祝愿。下面我们言归正题，跟我们介绍ELISA试剂盒组份和操作过程。ELISA中有三个必要的试剂：免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。
ELISA试剂盒操作过程：
1. 加规范品：在酶标包被板上设规范品孔，依次参加不同浓度的规范品50ul(主张每个浓度做2个平行孔)
2. 加样：别离设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其他各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品40μl，
然后再加样品亲和素10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，悄悄晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗刷液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5. 洗刷：当心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗刷液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：除空白孔外每孔参加酶标试剂50μl。
7. 温育：操作同3。
8. 洗刷：操作同5。
9. 显色：每孔先参加显色剂A50μl，再参加显色剂B50μl，悄悄震动混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 停止：每孔加停止液50μl，停止反响(此时蓝色立转)。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加停止液后15分钟以内进行。
完整的ELISA试剂盒包括以下各组分：
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)
(2)酶符号的抗原或抗体(结合物)；
(3)酶的底物；
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中)，参阅规范品和控制血清(定量测定中)；
(5)结合物及标本的稀释液；
(6)洗刷液
(7)酶反响停止液。
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