严格要求ELISA操作定当做出好试验
2019-07-05
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我们知道,能够用作ELISA测定的标本很广泛,包含了体液、分泌物和排泄物等,均可作标本以测定其间某种抗体或抗原成份。这些标本搜集的时间、办法和保存都有一定的要求。今日研域(上海)为您解说:ELISA操作严格要求定当做出好试验。
按试剂盒说明书的要求准备试验中需用的试剂。ELISA顶用的蒸馏水或去离子水,包含用于洗刷的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计丈量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后运用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
洗板办法:
① 手工洗板,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在试验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将引荐的洗刷缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
② 自动洗板,如果有自动洗板机,应在娴熟运用后再用到正式试验过程中。
试剂盒的配制:关于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节。在运用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地回收其间的细胞因子。根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。一般待测抗原规范曲线的线性规模的可通过将规范品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用规范的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改动酶底物体系可在一定规模内提高灵敏度。为了优化灵敏度,建议孵育规范品和标本。若运用过氧化物酶作为显色体系,应禁止在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物ELISA试剂盒酶的活性。
试剂盒的操作因固相载体的构成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
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