在ELISA实验前的留意事项

ELISA实验时，留意事项如下：
正式实验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制实验条件，待检样品应作一式二份，以确保实验结果的准确性。有时本底较高，阐明有非特异性反响，可选用羊血清、兔血清或BSA等关闭。
在ELISA中，进行各项实验条件的挑选是很重要的
实验其中包括：
1）固相载体的挑选：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行挑选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反响，调查其显色反响是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。
2）包被抗体（或抗原）的挑选：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多选用4℃18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它实验条件相同时，调查阳性标本的OD值。挑选OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。关于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。
仔细阅读阐明书
1.确认试剂盒在有效期内
2.按阐明书确认一切试剂*（数量、体积）
3.标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份。短期内无法实验者，留意低温保存
4.准备好一切实验额定所需物品，如试管、吸头、移液器、离心机等
5.依据检测标本数量确认所需试剂的量
6.按阐明书将所用试剂平衡至室温，制造所需试剂
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