做优化ELISA试剂盒加样应留心哪些步骤

ELISA试剂盒加样的优化：在这一进程中，一般情况下有三次加样，它们分别是加标本，加酶物，加底物。冻住血清融解后，蛋白质部分浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，防止气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上剧烈振动。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只需待血清天然凝集、缩短后即可获得。也可在板孔中参与稀释液，再在其参与血清标本，然后在微型颤动器上颤动1分钟以确保混和。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，跨过一星期测定的需低温冰存。

ELISA试剂盒常见液体样本处理方法

1、血清：用无菌管搜集，室温血液自然凝固10-20分钟，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如出现堆积，应再次离心。

2、尿液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。

3、血浆：应根据标本的要求挑选EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应该再次离心。

4、胸腹水：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。

5、脑脊液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。

6、唾液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。

7、细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管搜集。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。

8、牛奶：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。