ELISA试剂盒成果分析操作与技巧
细节决定胜败,这关于试验室科研工作者来说也是如此。在ELISA试剂盒试验中的各项操作细节有许多,如尽量少用排枪、勤换枪头,加样时由低浓度向高浓度加,因为这样能够减少跳孔的几率。而整个试验的zui后要害就是作用的处理办法了,那么在在今日的技术文章中,公司为您带来的是ELISA试剂盒作用分析办法。
1:ELISA试验中样品都要做复孔或三孔,然后核算每个浓度规范品的均匀OD值,复孔的变异系数应该小于20%。
2:均匀OD值减去空白孔的OD值。
3:制作规范曲线。
以减去本底后的OD值为X轴,规范品的浓度为Y轴,使用作图软件得出一个合适的核算办法。建议运用合适的软件来作图,比方CurveExpert 1.4。这款软件能够给出许多种办法(比方直线、半对数、对数、四参数方程等)并从中挑选一条zui合适的方程。要想查验某条曲线是否与表中数据符合,能够将规范品的浓度作为未知数,将对应的OD值带入该方程,核算出规范品的浓度,得到的作用应该与实际浓度很挨近(+/-10%)。挑选拟合度zui高的那条曲线。
假定呈现规范曲线的线性欠好,或平行性欠好(双孔对照孔的OD值不同很大),或呈现跳孔的现象,或许引起的原因有酶标板孔间彼此污染、洗板后未能从速进行下一步操作、增加样品或其它试剂时操作的办法不对、孵育方位避光性欠安或盖板膜没有密封好使得水分蒸发、酶标板孔问参加的试剂量不同,相对应的解决办法是加样时请当心勿将液体溅人另一孔中,人工洗板时也请当心,勿将洗涤液溅人另一微孔中、在洗板后及时进行下一步操作、增加试剂时请悬空滴入,紧记勿将枪头接触到板孔内,罗致不同试剂瓶中的液体时就要更换一次枪头、承认孵育环境不透光,盖板膜将酶标板密封好、运用已校正过的微量加样器,如将*次参加液体时枪头上留有一滴的液体滴下,那么将以后枪头上留有的液体也滴下,以确保参加液体体积的一致性。
看完了供给的这些技术,有没有收获呢?公司ELISA试剂盒质量安稳牢靠;经济实惠,咨询。