细胞五分类技能及其运用发展

细胞分析仪是医院临床查验运用十分广泛的仪器之一，是指对必定体积内血细胞数量及异质性进行分析的仪器。20世纪9o年代以来，跟着电子技能、流式细胞技能、激光技能、电子计算机技能和新荧光化学物质等各种高新技能在血细胞分析仪中的运用.使血细胞分析仪的检测原理不断完善、测量参数不断增加、检测水平不断提高.尤其在白细胞五分类技能方面，已发展到使用多项技能（如射频、细胞化学染色、流式细胞术和荧光染色技能等）联合一起检测一个白细胞.再用先进的计算机技能区别、辨别经上述办法处理后的各自细胞间的细胞不同.综合分析实验数据，得出较为精确的白细胞分类成果。为临床疾病的诊断、治疗供给了重要的实验室根据。近年来。能够对白细胞进行五分类计数的血细胞分析仪现已普遍运用。本文就现在血细胞五分类测定中常用技能及其运用发展作一综述。

1 细胞五分类技能的原理
1. 流式细胞术
 流式细胞术（flow cytometry，FCM）是一种综合运用光学、机械学、流体力学、电子计算机、细胞生物学、分子免疫学等学科技能，使被测溶液流经测量区域，并逐个检测其间每一个细胞的物理和化学特性，从而对高速活动的细胞或亚细胞进行快速定量测定和分析的办法。
首先，待测细胞经处理或染色后被压人活动室，与此一起，不含细胞的缓冲液在高压下从鞘液管喷出，鞘液管人口方向与待测样品流成必定视点，这样鞘液就能被包绕着样品高速活动，组成一个圆形的流束，待测细胞在包绕下单行摆放，顺次经过检测区域.在激光束的照射下发生散射光和激起荧光。这两个光源信号分别反映了细胞体积的巨细和内部的信息.经光电倍增管接纳后可转换为电信号，再经过模，数转换器.将接连的电信号转换为可被计算机识别的数字信号，经计算机处理，可将分析成果显示在屏幕上。
为了确保细胞单个摆放地逐个经过检测区域，鞘流技能在流式细胞术中被广泛运用。根据层流理论，因为两种液体的流速和压力不同。在必定条件下样品溶液与包裹它的鞘液在活动中能够保持彼此分离并且同轴。一起鞘液流能够加快样品溶液中颗粒的活动并迫使他们的活动轨道保持在液流的中轴线上，使细胞单摆放地逐个经过检测区域，这便是所谓的液流聚集原理

2.阻抗法
根据库尔特原理，将不良导体血液按必定份额稀释于等渗的电解液中，在小孔电极的两侧加一恒流源.在负压效果下，使稀释的血细胞经过小孔。当细胞经过截面时会因为电阻增大发生相应的脉冲，其脉冲的幅度与细胞的体积成正比，脉冲的频度与细胞的数量成正比。这便是的库尔特原理或称变阻脉冲原理。使用库尔特原理能够有效地区别淋巴及单核细胞。

3. 激光散射法／多视点偏振光散射技能
根据光散射理论，当激光照射到活动室内流过的每一个细胞时，因为细胞的物理特性，部分光线从细胞上经不同的视点散射。其间，前向小视点散射光的光强能够反响细胞体积；大视点散射光的光强能够反响细胞核，浆复杂度和细胞颗粒的信息；而侧向散射光的光强能够反响细胞膜、核膜、细胞质的变化。因而，能够根据细胞表明光散射的特色对细胞进行分类。用激光光源发生的单色光束直接进入计数池的敏感区，在不同视点（10度～7O度）对每个细胞进行扫描分析，测定其散射光强度，从而供给细胞结构、形态的光散射信息。因为粗颗粒细胞的散射强度比细颗粒细胞更强，故光散射对细胞颗粒的构型和颗粒质量具有很好的区别能力。