细胞ERK1/2激酶试剂盒的用途和注意事项
细胞ERK1/2激酶总活性光度法定量检测试剂盒的用途和注意事项
主要用途
细胞ERK1/2激酶总活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过多肽底物,在ERK1/2激酶敏感性抑制剂存在与否的情况下,受到ERK1/2激酶磷酸化后,进而由丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环法反应系统,测定产生ADP过程中,伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反应, 即采用光度法测定其氧化后吸光峰值的变化,以分析细胞裂解样品中ERK1/2激酶总活性而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取液样品(动物、人体)、部分或*纯化酶样品中ERK1/2激酶的定量检测,以及抑制剂和激活剂的筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,高度敏感。
注意事项
1. 本产品为20次操作
2. 操作时,须戴手套
3. 系统操作过程中,背景测定只需1次
4. 样品处理忌用磷酸缓冲溶液
5. 样品须澄清,至关重要
6. 加入样品启动反应后3秒内即刻光度测定
7. 建议使用比色皿测定
8. 测定值由高到低变化;测定可持续30分钟
9. 光度测定后,比色皿须清洗*
10. 样本测定0分钟读数高于5分钟读数表明具有酶活性
11. 样本测定读数持续上升,表明酶活过低或样品量过低
12. 非特异活性高于总活性,表明特异性酶活过低或样品量过低
13. 建议待测样本蛋白浓度为100微克/10微升(本公司提供 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-GMS30030.1)
14. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度
15. ERK激酶活性单位浓度定义:在30℃温度下,pH 7.5条件下,每分钟内能够氧化1微摩尔还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)所需的酶量作为一个活性单位
16. 本公司提供系列蛋白激酶检测试剂产品