RNA提取-注意事项

1.实验室应专门辟出RNA操作区，离心机，移液器，试剂等均应。RNA操作区应保持清洁，并定期进行除菌。

2.在超净台中按照细胞培养的要求进行操作，可以有效避免操作中引起的RNA酶污染。

3.操作过程中应始终戴一次性橡胶手套，并经常更换，以防止手、臂上的细菌和真菌以及人体自身分泌的RNA酶带到试管或污染用具，尽避免使用一次性塑料手套。塑料手套不但常常造成操作不便，且塑料手套的多出部分常常在器具的RNase污染处和RNase-free处传递RNase，扩大污染。

4.避免在操作中说话聊天。也可以戴口罩以防止引起RNA酶污染。

5.尽量使用一次性的塑料制品，尽量避免共用器具如滤纸，离心管，枪头等，以防交叉污染。例如，从事RNA探针工作的研究者经常使用RNase H，T1等，在操作过程中极有可能造成移液器、离心机等的污染。而这些污染了的器具是RNA操作的大敌。

6.关于一次性塑料制品，建议使用厂家供应的出厂前已经灭菌的枪头和离心管等。多数厂家供应的无菌塑料制品很少有RNA酶污染，买来后可直接用于RNA操作。许多研究者用DEPC等处理的塑料制品，往往由于二次污染而带有RNA酶，从而导致实验失败。

7.配制溶液用的酒精、异丙醇、Tris等应采用未开封的新瓶。

8.所有旧塑料制品都必须用0.5M的NaOH处理10分钟，用双蒸水*冲洗，DEPC-H20浸泡过夜后灭菌。

9.无法用DEPC处理的用具可用氯仿擦拭若干次，这样通常可以消除RNA酶的活性。但氯仿会溶解某些塑料制品，应当注意。

10.如果需要远距离运输或长期储藏RNA样品，建议先将标本（细胞、组织）保存在RNA保存液中。