上海研域生物普及大鼠ELISA试剂盒测定得到准确的结果

大鼠ELISA试剂盒的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。下面上海研域生物普及大鼠ELISA试剂盒样本处理及要求：

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，大鼠ELISA试剂盒应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。大鼠ELISA试剂盒用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可 将标本放于 -20 ℃保存，但 应 避免反复冻融 .

7.  不能检测含NaN3的样品 ，大鼠ELISA试剂盒因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

大鼠ELISA试剂盒操作步骤：

标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100 μ l，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50 μ l，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100 μ l分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50 μ l，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50 μ l弃掉，再各取50 μ l分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50 μ l分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50 μ l，混匀后从第七、第八孔中分别取50 μ l加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50 μ l，混匀后从第九第十孔中各取50 μ l弃掉。（稀释后各孔加样量都为50 μ l，浓度分别为1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L ）。

加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、 待测样品孔 。大鼠ELISA试剂盒在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40 μ l，然后再加待测样品10 μ l（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁， 轻轻 晃动 混匀 。