正常人外周血白细胞的分离-加速红细胞沉降法

 利用高分子量的聚合物促使红细胞凝聚成串钱状，从而加速红细胞沉降，使之与白细胞分离。常用的高分子聚合物有明胶、右旋糖酐及甲基纤维素等。

正常人外周血白细胞的分离-加速红细胞沉降法

1 、试剂及配制
1）3%明胶（粘度为25泊以上）：选取明胶，用生理盐水配成3%溶液，置沸水浴加热溶解，分装，高压蒸汽灭菌8磅15～20min。
2）6%右旋糖酐（分子量200～400KD）：用生理盐水配制。

2 、操作方法
1）取抗凝静脉血加入等量3%明胶盐水或6%右旋糖酐溶液中，混匀。
2）将试管直立静置室温或37℃温箱中30～60min，利用明胶与红细胞的粘合作用，促使红细胞快速下沉，而白细胞留在明胶溶液中。
3）用毛细吸管吸取富含白细胞的上层液，移入另一试管中。
4）加入无Ca2+ 、Mg2+ Hank’s液至离试管口3cm处，混匀，以水平离心机2000r/min 离心10min，弃上清，同法在洗涤两次。
5）沉淀细胞用适量10%～20% 灭活小牛血清的Hank’s液重悬，计数，配成所需的细胞浓度的悬液，一般常用2×106 /min。

正常人外周血白细胞的分离-加速红细胞沉降法