ELSA试剂盒常用方法的优势劣势进行对比

       我们知道，ELSA试剂盒可分为多种类型测定，是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或的分析技术。我公司技术部将名种ELSA试剂盒常用方法的优势劣势进行对比。

一、直接法

将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的抗体，即可测定抗原总量，此抗体的特异性非常重要。

1.优势:操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。

2.劣势:试验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。

二、间接法:

此测定方法与直接法类似，差别在于抗体没有酶标记，改用酶标记的二级抗体去辨识抗体来测定抗原量。

1.优势:二抗可以加强信号，而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的抗体则能保留它多的反应性,。

2.劣势:交互反应发生的机率较高。

三、双抗体夹心法:

被检测的抗原包被在两个抗体之间，其中一个抗体将抗原固定于固相载体上，即捕捉抗体。另一个则是检测抗体，此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量;或不标记，再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取，才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。

1.优势:高灵敏、高专一性，抗原无须事先纯化。

2.劣势:抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。

四、竟争法:

样本里的抗原(自由抗原)和纯化并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一起竟争相同的抗体，当样品里的自由抗原越多，就可以结合越多的抗体，而固定抗原就只能结合到较少的抗体，反之亦然，经清洗步骡，洗去自由抗原和抗体的复合物，只留下固定抗原和抗体的复合物，拿来与只有固定抗原的对照组结果相比较，根据呈色差异就可计算出样品里的抗原含量。

1.优势:可适用比较不纯的样本，而且数据再现性很高。

2.劣势:整体的敏感性和专一性都较差。

五、新ELISA试剂盒技术:

基于细胞法是一种新的定性蛋白检测技术，将细胞直接在微孔板里培养，待检测时，不需抽提蛋白和裂解细胞，便可直接测量微孔板里蛋白经刺激或抑制作用后的变化。

1.优势:无需裂解细胞，所以目标蛋白损失少，可测定完整细胞、黏附细胞、还有非粘附细胞。

2.劣势:不能测定抗原量。