小鼠ELISA试剂盒技术说明

小鼠ELISA试剂盒的整体概念。接着分别从原理、特点和使用方法三个方面进行说明。在原理部分，简述了抗原 - 抗体特异性结合反应的过程。特点方面突出了高灵敏度、特异性强、操作简便和稳定性好等优势。使用方法则按照一般的实验流程，从样本处理到最终测定进行了较为详细的描述。

     采用抗原 - 抗体特异性结合反应。将已知的抗原或抗体固定在固相载体表面，加入待检测的小鼠ELISA试剂盒样本，样本中的目标分子与固相载体上的抗原或抗体结合，再加入酶标记的二抗，通过酶催化底物产生显色反应，根据颜色的深浅来确定目标分子的含量。

一、操作步骤：

1．使用前，将所有小鼠ELISA试剂盒充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，小鼠ELISA试剂盒轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7.   每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9．在450nm波长处测定各孔的OD值。 需要而未提供的小鼠ELISA试剂盒和器材。

二、特点：

高灵敏度：能够检测到微量的目标分子。

特异性强：对特定的目标分子具有高度的选择性。

操作简便：无需复杂的仪器设备，实验步骤相对简单。

稳定性好：小鼠ELISA试剂盒在一定的储存条件下能够保持较长时间的稳定性。

三、使用方法：

样本处理：根据不同的目标分子，对小鼠ELISA试剂盒样本进行适当的处理。

加样：将标准品和处理后的样本加入到小鼠ELISA试剂盒的微孔板中。

孵育：在特定的温度和时间下进行孵育，使抗原 - 抗体充分结合。

洗涤：去除未结合的物质。

加酶标二抗：加入酶标记的二抗。

再次孵育和洗涤。

显色：加入底物，产生显色反应。

测定：使用酶标仪测定吸光度值，计算目标分子的含量。

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