研域生物带您了解选择大鼠ELISA试剂盒时，需要考虑以下几个关键因素

大鼠ELISA试剂盒是一种广泛应用于生物医学研究的实验工具，它通过酶联免疫吸附试验(ELISA)技术来检测和定量分析大鼠体内特定蛋白质的表达水平。

在选择大鼠ELISA试剂盒时，需要考虑以下几个关键因素：

1.蛋白浓度：通过NCBI、uniprot等数据库查找待测样本的蛋白表达量参考值，与试剂盒中给出的样本值进行比较。

2.应用种属与检测样本种类：确保试剂盒适用于大鼠样本，并注意不同抗凝剂处理的血清和血浆、细胞上清及细胞裂解液等样本类型的适用性。

3.检测范围与稀释线性：选择具有合适检测范围和良好稀释线性的试剂盒，以确保待测样本浓度落在标曲范围内。

4.灵敏度与变异系数：高灵敏度的试剂盒适用于低浓度样本的检测；板间和板内变异系数(CV%)应小于10%。

5.有效期：考虑试剂盒的有效期，确保在有效期内使用。

大鼠ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验。具体步骤如下：

1.包被：将特异性抗体(如大鼠白细胞介素1β捕获抗体)预先包被在微孔板中。

2.加入样本和标准品：依次加入待测样本、标准品以及HRP标记的检测抗体。

3.温育与洗涤：经过一定时间的温育后，洗涤以去除未结合的成分。

4.显色反应：加入底物TMB(四甲基联苯胺)，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅与样品中的特定蛋白质含量呈正相关。

5.读数与分析：用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品浓度。

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