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免费代测人视黄醇结合蛋白-ELISA 检测试剂盒

2012-08-02 [1184]

人视黄醇结合蛋白-ELISA 检测试剂盒

用 途:
    人RBP-4 ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各种体液中的RBP-4 。本试剂盒可以检测天然和重组的RBP-4 。本试剂盒于科研、而非用于临床诊断。
    
试验原理:
    人RBP-4 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知RBP-4 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将RBP-4 和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中RBP-4 的浓度呈比例关系。

自备材料
蒸馏水。
加样器:5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
振荡器及磁力搅拌器等。

 

安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。


人视黄醇结合蛋白-ELISA 检测试剂盒

操作注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

洗涤缓冲液(20×)的稀释:蒸馏水20倍稀释。

人视黄醇结合蛋白-ELISA 检测试剂盒

操作步骤
使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果分析
以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的RBP-4 标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的RBP-4 含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。

人视黄醇结合蛋白-ELISA 检测试剂盒

试剂盒性能
灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
特异性:不与人其它细胞因子反应。
重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

Methyl salicylate 水杨酸甲酯 [119-36-8] 250ml
3-Methylsalicylic acid 邻甲基水杨酸 [83-40-9] 250g
4-Methylsalicylic acid 4-甲基水杨酸 [50-85-1] 250g
5-Methylsalicylic acid 5甲基水杨酸 [89-56-5] 25g
Methyl stearate 硬脂酸甲酯 [112-61-8] 250g
Methylsuccinic acid 2-甲基琥珀酸 [498-21-5] 25g
4-Methyl-5-thiazolecarboxylic acid 4-甲基噻唑-5-羧酸 [20485-41-0] 10g
Methyl thymol blue 甲基百里香酚兰 / 25g
Methyl thymol blue tetrasodium salt 甲基百里香酚兰四钠盐 [1945-77-3] 25g
Methyl-p-toluenesulfonate 对甲苯磺酸甲酯 [80-48-8] 250g
Methyltriphenylphosphonium bromide 甲基三苯基溴化膦 [1779-49-3] 100g
NAD trihydrate 氧化型辅酶 I [53-84-9] 25g
NADH-Inhibitor 还原型辅酶 I 抑制剂 / 10mg
Nadic anhydride 内次甲基四氢苯二甲酸酐 [129-64-6] 100g
4-Methylumbelliferyl acetate 4-甲基散形乙酸 [2747-05-9] 1g
4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-galactosaminide 4-甲基伞形酯-N-乙酰-b-D-氨基半乳糖苷 [36476-29-6] 100mg
6-Methyluracil 6-甲基尿嘧啶 [626-48-2] 100g
Methyl violet 2 B 龙胆紫 [8004-87-3] 25g
Metol 米吐尔 [55-55-0] 50g
Metribuzin 嗪草酮 [21087-64-9] 1g
Metronidazole 甲硝唑 [443-48-1] 25g
Metronidazole 甲硝唑 [443-48-1] 100g
Miconazole nitrate 硝酸益康唑 [22832-87-7] 25g
Miconazole nitrate 硝酸益康唑 [22832-87-7] 100g
Minocyclin hydrochloride 米诺环素盐酸盐 [13614-98-7] 1g
Minocyclin hydrochloride 米诺环素盐酸盐 [13614-98-7] 5g
Mithramycin A 光神霉素 [18378-89-7] 1mg
Mithramycin A 光神霉素 [18378-89-7] 5mg
NADP 氧化型辅酶 II [24292-60-2] 1g
Molecular sieves 3A 分子筛(3A) 球状, 钾-A型分子筛 [308080-99-1] 500g
Molecular sieves 4A 分子筛(4A) 球状 钠-A型分子筛 [70955-01-0] 500g
Molecular sieves 分子筛() 球状钙-型分子筛 [69912-79-4] 500g