48T人白细胞介素-17ELISA检测试剂盒
人白细胞介素-17ELISA检测试剂盒
本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆
试验原理:
IL-17试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-17浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IL-17和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-17的浓度呈比例关系。
自备材料
蒸馏水。
加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
人白细胞介素-17ELISA检测试剂盒
操作注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人白细胞介素-17ELISA检测试剂盒
操作步骤
使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
人白细胞介素-17ELISA检测试剂盒
结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IL-17标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IL-17含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
Trypsin Inhibitor, Lima Bean 胰蛋白酶抑制剂 (利马豆) / 100mg
Trypsin Inhibitor, Ovomucoid 胰蛋白酶抑制剂 / 500mg
Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas 胰蛋白酶原 / 100mg
Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas 胰蛋白酶原 / 500mg
Tryptamine 色胺 [61-54-1] 1g
D-Tryptophan D-色氨酸 [153-94-6] 10g
DL-Tryptophan DL-色氨酸 [54-12-6] 10g
L-Tryptophan L-色氨酸 [73-22-3] 50g
L-Tryptophan L-色氨酸 [73-22-3] 250g
TTC 红四氮唑 [298-96-4] 5g
TTC 红四氮唑 [298-96-4] 25g
T-2 Toxin from Fusarium tricinctum, T-2毒素 [21259-20-1] 5mg
Tulobuterol hydrochloride 盐酸妥洛特罗 [56776-01-3] 5g
Tungsten powder 钨粉 (200目) [7440-33-7] 50g
Tungsten carbide-200 碳化钨-200 [12070-12-1] 50g
Tungsten (VI) oxide 三氧化钨 [1314-35-8] 100g
Tungstic (VI) acid 钨酸 [7783-03-1] 100g
Tunicamycin from Streptomyces lysosuperficus .衣霉素 [11089-65-9] 5mg
Turpentine oil 松节油 [8006-64-2] 500ml
Tween-20 吐温-20 [9005-64-5] 500ml
Tween-20 吐温-20 [9005-64-5] 500ml
Tween-60 吐温-60 [9005-67-8] 500ml
Tween-80 吐温-80 [9005-65-6] 500ml
Tween-80 吐温-80 [9005-65-6] 500ml
Tyramine hydrochloride 盐酸酪胺 [60-19-5] 1g
D-Tyrosine D-酪氨酸 [556-02-5] 1g
DL-Tyrosine DL-酪氨酸 [556-03-6] 25g
DL-Tyrosine DL-酪氨酸 [556-03-6] 100g
L-Tyrosine L-酪氨酸 [60-18-4] 100g
L-Tyrosine L-酪氨酸 [60-18-4] 500g
L-Tyrosine disodium salt hydrate L-酪氨酸二钠盐 [69847-45-6] 25g
Tyrosine decarboxylase 酪氨酸脱羧酶 [9002-09-9] 25U
Tyrosine decarboxylase from Streptococcus faecalis 酪氨酸脱羧酶 [9002-09-9] 250mg
L-Tyrosine methyl ester hydrochloride L-酪氨酸甲脂盐酸盐 [3417-91-2] 25g
Undecyl β-D-maltoside 十一烷基β-D麦芽苷 [170552-39-3] 250mg
Uracil 尿嘧啶 [66-22-8] 100g
Uracil 尿嘧啶 [66-22-8] 500g
Uracil 尿嘧啶 [66-22-8] 25g
Uracil 尿嘧啶 [66-22-8] 100g
Ursodeoxycholic acid 熊去氧胆酸 [128-13-2] 5g
Urapidil hydrochloride 盐酸乌拉地尔 [64887-14-5] 10g
Urea 尿素 [57-13-6] 500g
Urea 尿素 [57-13-6] 2kg
Urea 尿素 [57-13-6] 500g
Urea 尿素 [57-13-6] 2kg
Urease fromJack bean 脲酶 / 250mg
Urease fromJack bean 脲酶 / 1g
Uricase from Candida 尿酸酶 >2U/mg [9002-12-4] 100U
Uridine 尿苷 [58-96-8] 25g
Uridine 尿苷 [58-96-8] 100g
Ursolic acid 熊果酸 [77-52-1] 5g
DL-Valine DL-缬氨酸 [516-06-3] 25g
Vaseline 医用 凡士林(石油脂I) [8009-03-8] 500g
Uridine-5’-diphosphate 尿苷5’-二磷酸二钠盐 [21931-53-3] 100mg
Uridine-5’-diphosphate 尿苷5’-二磷酸二钠盐 [21931-53-3] 500mg