ELISA试剂盒实验重复性差的原因分析及解决方法

1、ELISA试剂盒样品数量不一，加样时间长短不一；
重复某一样品时，加样时间尽可能与*次接近。
2、样品加入后未混匀；
加样后在混匀器上充分混匀。
3、酶标仪滤光片不对或输入波长不对；
TMB显色用450/630波长.
4、酶标仪测定重复性差；
校对酶标仪。
5、洗涤不正确；
洗涤液注满各孔但不要溢出。洗板时反应板面向下，垂直用力甩净内容物（可多甩几次），在干净、无或少尘的吸水材料上拍干。洗板机洗板时不应有堵孔，洗涤应充分。
6、温育条件不一致（一次用水育，一次用恒温箱）
恒温箱温育较水浴显色深， OD值高出0.1-0.15,均采用恒温箱.如用水浴水温应控制在37℃。
7、不慎多加或少加酶或显色剂；
多加时显色深，少加则浅，用记号笔圈上，便于分析。
8、阈值附近时阴时阳；
同一样品做三个复孔，以二个（含二个以上相同结果为准）
9、ELISA试剂盒实验加样量不足、保温时间、洗涤条件一致；