酶联免疫试剂盒是一种很敏感的测定方法
2014-02-13
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酶联免疫试剂盒抗原抗体反应后直接测定形成的沉淀或浊度,敏感度可达 5~10μg/ml,但在临床检验中,某些待测物在标本中的含量远低于这一水平,因此要寻找增加敏感度的方法。标记的免疫测定是 将检测试剂中的抗原或抗体用可微量测定的物质加以标记,通过测定标记物来提高敏感度。在放射免疫测定和酶免疫测定中,标记物分别 为放射性核素和酶,zui后用测定放射性和酶活力来计算待检物的量,敏感度可比直接测定沉淀物提高数百至数千倍。在标记免疫测定中, 一般加入过量的标记试剂以保证与待测物*反应。以标记抗体(Ab ※)检测抗原(Ag)为例,反应式如下: Ag+ Ab※→ AgAb>※+ Ab※
酶联免疫试剂盒在反应产物中有与Ag结合的Ab※和游离和Ab※ ,如不将两者分离而测定标记物,测得的结果将为两者之和。因此,游离标记物与结合标记物的分离是标记免疫测定中的重要步骤。可采 用多种手段,固相载体是其中之一。如将抗原或抗体包被在固相载体上,白介素ELISA试剂盒然后再与标记的抗原或抗体直接反应,结合的标记物被固定在载 体上,而游离的标记物留于溶液中。这样可以通过洗涤将游离的Ab ※除去,结合标记物的测定可在固相上进行。