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ELISA试剂盒实验检测影响因素

2014-04-30 [708]

ELISA试剂盒是目前检验科常用的免疫学检测方法之一,其操作简单,无须特殊设备,使其在各级医院都有应用。
但是,如果忽视了影响其结果的因素,难免会造成假阴性或假阳性,因此,了解影响实验的因素,减少差错事故的发生是极其必要的。
1实验室操作人员的素质因素
实验室人员的素质主要包括五个方面:思想素质、文化素质、技术素质、心理素质、身体素质。首先应具备一个良好的思想素质,因为我们的服务对象是人,我们的道德水平直接关系到人们的健康和生命安危,如果马马虎虎。三心二意,难免会有差错事故发生,我们应该热爱专业,耐心细致。在工作中如标本混淆、张冠李戴、报告单发错等都有可能造成严重后果;其次文化素质和技术素质,我们要熟练掌握本专业的基本理论和基本技术,认真学习新理论新知识,努力提高自己的业务水平,创造一个能够胜任本职工作的技术平台。良好的心理素质就是要勇于面对工作生活中的挫折,在繁忙工作中,有条不紊,冷静沉着的处理有关事务。人员素质问题是影响检验结果的首要因素。
2 ELISA试剂盒标本处理因素
实验室人员收到标本后应认真查对,对不符合要求的标本和申请单要拘收,合格标本要及时分离血清,避免溶血,提取血清时不应混有大量纤维蛋白或细胞成分。对不能及时检测的标本要妥善保存于4℃冰箱,做好原始记录,标本管上标上待检者姓名、日期。从冰箱取出的标本要预温至室温,对冰冻的样品要融化好,并充分混匀再用。
3 操作过程的影响因素
3.1 操作前应对实验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18 C~25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等,要先查看水育箱温度,是否符合要求。
3.2 正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂,避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅,血清残留在反应孔壁上,加样器吸头要清洗干净,避免污染,加样次序要与说明书一致,否则可导致结果错误,实验重复性差。
3.3 手工洗板加洗液时冲击力不要太大,洗涤次数不要超过说明书推荐的洗涤次数,洗液在反应孑L内滞留的时间不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流,造成孔问污染,导致假阴性或假阳性。
3.4 要保证加液量一致 我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量不准,造成显色不统一,判断错误。
3.5 显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下,加显色系统后要避光反应,显色液量不能过多,以免显色过强。
4 ELISA试剂盒的影响因素
应选用有国家批准文号,质量靠得住的产品,不能图便宜,忽视质量保证。试剂应妥善保存于4℃冰箱内,在使用时先平衡至室温,不同批号的试剂组分不宜交叉使用。试剂开启后要在一周内用完,剩余的试剂下次用时应先检查是否变质,,显色剂如被污染变色将造成全部显色,导致错误结果。
过期的试剂不宜再用,若别无选择,应做好双份质控品的监测,确保结果的可靠性。
5 采取措施,避免差错事故的发生