酶联免疫试剂盒使用说明书
酶联免疫试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
预期应用
ELISA法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中PCT含量。
酶联免疫试剂盒实验原理
用纯化的PCT抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的PCT抗体、HRP标记的亲和素,经过*洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的。颜色的深浅和样品中的PCT呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
酶联免疫试剂盒组成及试剂配制
1、酶标板:一块(96孔)
2、标准品(冻干品):2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至1ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,000pg/ml,然后做系列倍比稀释液(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配成1,000pg/ml,500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,
62.5pg/ml,31.2pg/ml,15.6pg/ml,样品稀释液直接作为空白孔0pg/ml。如配制500pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)1,000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf
管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、样品稀释液:1×20ml。
4、检测稀释液A:1×10ml。
5、检测稀释液B:1×10ml。
6、检测溶液A:1×120/瓶(1:100)。临用前以检测稀释液A1:100稀释(如:10检测溶液A/990检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
7、检测溶液B:1×120/瓶(1:100)。临用前以检测稀释液B1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8、底物溶液:1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液:1×10ml/瓶(2mol/LH2SO4)。
11、覆膜:5张
12、使用说明书:1份 自备物品 1、酶标仪(建议仪器使用前提前预热)2、微量加液器及吸头,EP管3、蒸馏水或去离子水,滤纸