关于ELISA试剂盒原理实验条件和技术要点

ELISA试剂盒原理实验条件和技术要点在应用ELISA时，首先要清楚下面内容：1，是检测抗体还是抗原？2，检测的结果是定性还是定量？3，是否需要检测特异抗体的类型？4，所用抗体/单克隆抗体的亲和力怎样？(1)检测抗原  zui常用于检测抗原的方法是非竞争性的双抗体夹心法，其次是竞争法。但竞争法在具体实验中有些困难，特别是检测微生物的抗原，因为需要标记抗原，这对于某些抗原是很难做到的，甚至是不可能的。另外在竞争法中，酶标记的抗原与标本直接混合在一起，许多标本中含有酶抑制剂或蛋白A样物质，可影响ELISA的结果。(2)检测抗体  检测抗体种类常用的方法是检测抗体种类的捕获法，这个方法常用于检测特异性IgG、IgA和IgM.。这个方法的*步是捕获所需要检测的一个种类的抗体，接下来是检测捕获的抗体是否是特异性抗原的抗体。间接ELISA试剂盒在检测IgG时比较简单，但不适用于检测其他种类的抗体，因为血清中如果有特异IgG存在将与IgM或IgA等竞争结合抗原。