猪补体成分C7（C7）ELISA试剂盒使用方法

猪补体成分C7（C7）ELISA试剂盒检测程序：

在使用前，将所有试剂和样品室温。再次离心样品解冻后测定前。据建议，所有样品和标准来测定一式两份。

1。准备好所有试剂，工作标准和样品在前面的章节中。

2。请确定井数的使用，并把任何剩余的井和入袋干燥剂，密封保鲜袋，将未使用的井在4°C的含量布局表

。每孔加入100μl的标准和样品。封面用胶粘带提供。孵育2小时，在37℃下一盘布局记录标准和样品检测。

4。每孔中取出的液体，不洗。

5。向每孔中加入100μl生物素抗体（1倍）。盖上一个新的胶粘带。孵育1小时，在37℃下（生物素抗体（1X）可能会出现混浊。预热至室温，轻轻混匀，直到出现均匀解决方案。）

6。吸液的各孔和洗涤，共洗涤三次重复该过程两次。洗净，每孔填充洗涤缓冲液（200μL）使用喷瓶，多道移液器，歧管器，或autowasher，和，静置2分钟，*清除液体的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗涤后，清除任何剩余洗涤缓冲液的吸ordecanting。倒置板和涂抹对干净的纸巾。

7。向每孔中加入100μl的HRP-抗生物素蛋白（1×）。量的微量滴定板，用一个新的粘接剂条。温育1小时，在37℃下

8。重复的愿望/洗涤过??程中，在步骤6的5倍。

9。将90μlTMB底物添加到每个孔中。孵育15-30分钟，在37℃下避光

10。一站式解决方案，每孔加入底物，轻轻晃动酶标板，以确保充分混合。

11。在5分钟内，设置至450nm，使用酶标仪测定各孔的光密度。如果波长校正，设置为540nm或570nm处。在540nm或570nm波长在450nm处的读数减去读数。该减法校正板的光学缺陷。在450nm处未经修正读数直接，可能会比较高，不太准确。

猪补体成分C7（C7）ELISA试剂盒计算结果：

建议使用专业的软“曲线专家1.3"的标准曲线，这可以从我们的下载。

平均每个标准和样品的重复读数和平均减去零标准的光学密度。

标准曲线，通过减少使用能产生四参数逻辑（4-PL）的曲线拟合的计算机软件的数据。作为一种替代方法，建立标准曲线，对在y-轴的浓度通过绘制在x-轴为每个标准的平均吸光度，并绘制一个通过在曲线图上的点的*拟合曲线。该数据可以通过绘制的C7日志日志浓度与OD值，和可以通过回归分析确定的*拟合线线性化。此过程会产生足够的，但不太的适合的数据。