ELISA试剂盒五大检测方法

    zui近，站上关于ELISA试剂盒的讨论帖子非常多，今天也发表一下自己的一些看法，对ELISA的见解有不对的地方，希望指正或者直接拍砖。
首先，谈一下市场。首先RnD和Bender等一些的ELISA试剂盒还是很值得信赖的，也得到了市场的认可，特别是RnD的盒子，我们卖的很好，就是价格好贵，经费不是很充裕的实验室难消费的起。国内的厂家，质量在灵敏度上和RnD的盒子还是有很大差距，但是有一点是可以肯定的，盒子反映的结果是公正客观的。还有一个缺点就是厂家可供选择的盒子种类比较少，主要集中在炎症细胞因子上。
    第二，谈一下如何灵活应用ELISA这个检测方法以及如何去挑选ELISA试剂盒。ELISA这个方法的原理，大家都很清楚，网上的资料一大堆。可真正用起来的时候，有时候就有点犯糊涂，我谈一下自己的理解。
1、有些客户会用OVA（卵清蛋白）做一些哮喘，过敏性肠炎的模型，后来会检测粘膜特异性的sIgA以及血清里面IgG，IgE等指标。当客户向我咨询购买这几个指标的盒子的时候，我很肯定地说这些指标的检测要你自己特制，不会有商品化的盒子出售的。
2、对于一些小分子的检测，比如前列腺素、糖皮质激素的检测，我的理解是要用竞争法ELISA去检测，也要购买采用这个方法的盒子。一般细胞因子的检测，都是采用常规的夹心法ELISA检测，因为因子分子量比较大，一般10几个KD左右，很容易找到两个或者多个抗原表位。而小分子很难找到两个不同的表位，也就决定了包被抗体和检测抗体无法同时结合小分子并固相化。解决方案就是酶标板上包被二抗，每个孔加入一定量的酶标的小分子，然后加样品，再加不带标记的检测抗体，显色底物。样品的目的小分子的含量越高，吸光度越低。
3、对于胰岛素的检测，我还是推荐millpore 旗下LInco公司的检测试剂盒，不管是放免还是ELISA，据说权在他们手中。
4、做实验面向的ELISA试剂盒种属主要是人，大鼠和小鼠，现在市面上鸡、牛、马、羊、兔各种指标的盒子都有售，真不知道这些抗体是怎么来的，。据我所了解，这些炎症指标还是有很大种属特异性的。
5、好多客户有个误区，拿来一个指标就想当然地尝试用ELISA去检测，其实应该多动脑，该检测活性的检测活性，该做western的做western。ELISA试剂盒检测方法简单，灵敏度高，