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ELISA试剂盒的常用结果判定的方法

2016-04-07 [1338]

1.定性测定
 (1)ELISA试剂盒阳性判定值法(cut-offvalue,CO值):一般为阴性对照的平均A值加一个常数,试剂制备严格标准化,要先计算出阳性对照A值平均数和阴性对照A值平均数。标本A值≥CO值即为阳性。
(2)抑制率法:在竞争抑制法中结果可用抑制率表示。
抑制率(%)=(A阴性对照A-A待测)/阴性对照X100%,一般以抑制率≥50%为阳性试剂盒
2.半定量测定 结果一般以滴度表示。将标本连续稀释后,进行ELISA检测,在阳性临界值以上的zui高稀释度即为该标本的“滴度”。
3.定量测定 即用己知量的标准品作一系列稀释后进行ELISA试剂盒测定,与待测标本同时进行测定,绘制标准曲线,结果以量或活性单位表示之。
1 材料与方法
1.1 对象
115位患者,年龄在32~73岁之间平均(50.8±7.1)岁。都是临床初步诊断疑为肾病、糖尿病、风湿病及心血管病等等不同类型的患者。
1.2 标本采集及处理
取每位患者的晨尿4~5ml于冰箱4~8℃保存,收集至115份标本之后,1周之内同时采用2种方法测定。
1.3 试剂与仪器
美国DPC公司生产的IMMULITE型全自动化学发光分析仪;ELX—800酶标仪(美国BIO-TEK);洗板机(BIO-RAD,MODEL1575)。
化学发光法试剂为:美国DPC公司生产的YZB/USA 2153-40 白蛋白试剂盒; ELISA法 :尿微量白蛋白ELISA试剂盒。
1.4 方法
1.4.1 化学发光法:严格按照美国DPC公司生产的 白蛋白试剂盒 操作手册进行。
1.4.2 ELISA 法:严格按照尿微量白蛋白ELISA试剂盒的操作手册进行。
1.4.3 测定分析:用上述两种方法对上述115份患者尿标本微量白蛋白浓度进行测量,分别在ELX—800酶标仪上和全自动化学发光分析仪上直接读取结果。
1.5 统计学检验:采用SPSS10.0统计软件,检测数据表示用x±s,组间数据比较用t检验,变量间的变化采用相关性分析。